开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一 ．研究背景
人类表皮生长因子受体(Human epidermal growth factor receptor)家族是酪氨酸激酶受体,他们包括4种同源的跨膜蛋白:HERl、HER2、HER3和HER4。其中HER2蛋白又与乳腺癌的增殖及生长密切相关。研究表明：HER2蛋白膜内段的各酪氨酸残基发生磷酸化后均能作用于特定的信号蛋白。这些信号传导途径的异常又和各种肿瘤的生长,增殖息息相关。
乳腺癌是是全球范围内发病率增长最快的疾病之一，我国女性乳腺癌发病率和死亡率在全球处于比较低的水平，但呈迅速增长的趋势，尤其是农村地区近10年来上升趋势明显。其较高的发病率和死亡率给个人和社会都带来了沉重的负担。而每10个乳腺癌患者中，有2～3个是HER2阳性患者，而这部分患者相对于其他患者而言，肿瘤侵袭性较强，所以对此类患者的治疗方式也有所不同。目前临床给药一般以曲妥珠单抗为主。据最新FDA数据显示联合用药可以显著增加治疗效果，帕妥珠单抗已经被FDA批准，并现在已经被用于辅助治疗HER2阳性乳腺癌。临床试验表明，在以曲妥珠单抗为基础的化疗药物中添加帕妥珠单抗可提高早期HER2阳性乳腺癌的治愈率。
帕妥珠单抗，是一种人源化的单克隆抗体，可以作为HER2二聚抑制剂，来减少HER2与其它HER家族受体形成异二聚体，从而起到抑制肿瘤生长的作用。帕妥珠单抗和曲妥珠单抗相比，有自己独特的作用机制，当与曲妥珠联合给药后，可以显著提升阻断HER信号通路的能力。帕妥珠单抗和多西他赛，曲妥珠单抗的联合使用是目前治疗HER2阳性乳腺癌的一线药物，为广大患者带来了福音。
二 .研究目的和意义
本课题通过上游分子构建，及下游细胞加压筛选，以期获得能够稳定表达IgG1的细胞株，为研制和开发帕妥珠单抗提供理论基础和实验依据。
通过本次实验，了解分子构建的基本操作流程及原理，以及如何实现细胞操作，并获得设计实验理念及避免实验思维误区。
三 .实验流程
- IgG1抗体轻链重链可变区进行设计
在drugbank上获得pertuzumab的氨基酸序列，通过考虑一下几个因素进行序列的设计优化：密码子偏爱性、mRNA二级结构、GC含量、CpG二核苷酸含量、隐藏的拼接位点、过早的polyA位点、酶切位点等因素，优化设计得到轻链重链的基因序列。
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