裂殖壶菌MAPK信号转导通路基因的表达及功能研究文献综述

 2021-11-04 08:11

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本实验研究环境刺激下裂殖壶菌HSP信号转导通路基因的表达及功能研究。

裂殖壶菌在环境刺激下，体内的HSP转导通路进行表达，帮助细胞抵抗一系列环境刺激。

这个实验通过将HSP转导通路单独提取出来，通过查找文献得知了四个关键片段，提取裂殖壶菌中HSP10/HSP20/HSP70/HSP90片段，通过质粒导入到大肠杆菌细胞中，培养一段时间后，将的大肠杆菌质粒提取出来去进行DNA测序，提取构建HSP10/HSP20/HSP70/HSP90-pESC-Leu工作质粒，然后将重新构建好的质粒导入到酵母细胞中，在温度胁迫和渗透压胁迫中观察HSP蛋白对酵母细胞生长的缓解状况。

整个过程将进行以下的工作1.HSP10/HSP20/HSP70/HSP90生物信息学分析2.构建HSP10/HSP20/HSP70/HSP90-pESC-Leu工作质粒3.重组质粒在酿酒酵母中的筛选4.温度胁迫下HSP蛋白对于酿酒酵母生长状态的缓解情况5.渗透压胁迫下HSP蛋白对于酿酒酵母生长状态的缓解情况要进行的操作有：1，载体的构建，PCR，大肠杆菌转化，酵母转化2，酵母阳性质粒筛选3，生长曲线测定，存活率测定4，HSP蛋白序列比对以及结构预测。

关键词：裂殖壶菌 环境刺激 HSP信号转导1裂殖壶菌：二十二碳六烯酸(All-cis-4,7,10,13,16,19- docosahexaenoic acid, DHA) 属于ω-3多不饱和脂肪酸，作为一种重要的营养成分，因具有多种生理功能如维持婴幼儿视觉和神经系统的正常发育[1]、预防多种心血管疾病的发生[2]等而备受关注。

随着人们健康意识的日益增强，富含DHA的高质量油脂的需求和市场与日俱增[3]。

传统DHA来源是深海鱼油，但其可利用性、安全性和可持续性越来越受到诸多因素的挑战，如鱼类资源过度捕捞、海洋环境污染严重和高昂的纯化成本等[4-5]。

为了克服这些限制，人们早在1990年就开始尝试利用一些海洋真核微生物如破囊壶菌Thraustochytrium sp.和裂殖壶菌Schizochytrium sp.等，并借助生物技术实现了富含DHA油脂的工业化生产[6-7]。

关键词：裂殖壶菌 环境刺激 HSP信号转导二十二碳六烯酸(docosahexenoic acid，22∶6Δ4，7，10，13，16，19，简称 DHA)，俗称脑黄金，属 ω-3型多不饱和脂肪酸，它在预防高血压、动脉硬化、关节炎以及癌症等疾病方面具有显著功效［8］。

裂殖壶菌分裂快、发酵周期短、多不饱和脂肪酸含量高，已成为商业化生产DHA理想的生产菌之一［9］。

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