Caco-2细胞吸收模型的建立文献综述

 2022-12-29 10:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、实验目的

探索在合适的方法和实验条件下,建立Caco-2细胞单层模型。分别对其进行荧光黄检测实验检测相对荧光强度(RFU)、普萘洛尔等药物溶液渗透实验测量其表观渗透系数(Papp)、外排率以及回收率。并且利用上述数据,对该Caco-2细胞单层膜型的结构完整性、细胞外排及代谢功能进行初步评价。

二、实验背景

Caco-2细胞模型是最近国内外十分常用的一种研究药物体外吸收的模型,该模型在研究过程中操作简单、重复性较佳、应用范围较宽广。Caco-2细胞来源于人结肠癌细胞,其理化性质以及功能结构都十分类似于人的小肠上皮细胞,是模拟人小肠上皮细胞药物吸收的良好材料。不同于正常小肠上皮细胞,CACO-2细胞在多孔渗透性聚酯膜上可自发生长并分化成类小肠上皮细胞的单层细胞膜组织。该单层细胞组织可以模拟小肠上皮细胞的结构和功能,拥有和小肠内环境相似的酶系。如葡萄糖醛酸酶、谷氨酰胺转肽、氨基酸、蔗糖酶、二肽、碱性磷酸酶、P450细胞色素同工酶及糖、维生素B12等多种主动转运系统在CaCo-2细胞模型中都有与体内小肠细胞相似的表达。

在CACO-2细胞模型中,药物通过细胞层的顶侧(AP)跨过单层膜或者途径细胞旁路后到达底侧(BL)。一些脂溶性大的的药物溶解性好,通常经过刷状边缘被动转运跨膜运输。而另一些大分子或亲水性药物不易跨膜运输,通常有细胞旁路途径透过上皮。

CACO-2细胞模型的检验方法常见于以下几种:

(1)单层跨膜电阻(Transepithelial Electrical Resistance,TEER);

(2)表观渗透系数(The Apparent Permeability Coefficient,Papp);

(3)倒置荧光显微镜或透射电镜观察法。

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