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围绕酶固定化与细胞膜工程,在细胞膜表面构建了多酶催化体系,所得到的多酶体系成功催化甲壳素生成氨基葡萄糖。
在多酶体系的构建中,利用大肠杆菌细胞膜体系内的单体蛋白 CsgA 的自组装性,首先对其进行基因层面的改造,在其末端添加分子肽标签,使其成为功能性的纤维;进一步通过自连接的分子肽对 Spy pair 与 Snoop pair 将甲壳素代谢级联反应中的三酶有次序、可控的固定至细胞膜表面,进而获得多酶固定体系。
随着分子生物学及酶工程等学科的发展,已有酶库资源越来越丰富,该法提供了一个多酶催化平台构建的方法,既 可用于种内酶的串联,也可以根据底物、反应条件等限制选择来自不同宿主的酶,进行种间酶耦联。
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