开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 拟研究问题
胶质瘤是源自神经胶质细胞或神经前体细胞，是最常见、恶性程度最高的脑部原发性肿瘤。其中胶质母细胞瘤是致死率最高的脑肿瘤，中位生存期约为14.6个月。临床上常采用手术切除后放疗或化疗的方法进行医治，但是由于胶质瘤母细胞具有浸润性生长的特点，且易产生化学耐药导致治疗效果不佳，术后易复发。本课题主要研究缺氧条件下胶质瘤分泌的外泌体对肿瘤迁移的分子机制的研究。
- 研究手段
主要研究内容：
- 免疫荧光染色检测U87细胞摄取外泌体；
- q-pcr检测外泌体对U87细胞系迁移影响；
- WB检测外泌体对U87细胞系迁移影响。
研究方法：
在缺氧和常氧的条件下分别培养U87细胞，分别提取缺氧和常氧条件下培养的U87细胞的外泌体，将提取到的外泌体分别添加到常氧培养的U87细胞中。在处理结束后，采用CCK-8法检测不同来源外泌体对U87细胞增殖，迁移的影响。Transwell细胞侵袭法检测外泌体对细胞运动能力的影响。采用q-pcr和WB检测外泌体对细胞迁移的分子机制。
预期结果：
（1）了解缺氧环境下胶质瘤分泌的外泌体对肿瘤迁移的作用机制
- 外泌体在胶质瘤中的研究进展
- 外泌体
肿瘤细胞之间通过肿瘤微环境进行通信，进而影响周边细胞等生物学行为。肿瘤细胞分泌释放的信号分子通常被包裹在细胞外囊泡（EVs）中。EVs是具有磷脂双分子层结构的直径为30-2000nm的囊泡，含细胞基质而不具有细胞器，可依据其来源和大小进行分类。主要分为三个亚群：外泌体、微囊泡和凋亡小体。外泌体的直径为50-150nm，产生于多泡体（MVBs），成分包括蛋白质、核酸、脂类，其种类和含量取决于来源细胞，通过调控受体细胞发挥促进肿瘤生长的作用。
- 外泌体作用
2.1 促进肿瘤细胞的存活和增殖
胶质瘤来源外泌体通过调节肿瘤微环境，运送编码和非编码RNA，参与肿瘤增殖和生存的调控。转录微阵列分析显示，一些参与增殖调控的miRNA表达上调，如miR-451参与细胞增殖、转移和肿瘤细胞代谢的LKB1/AMPK信号通路；miR-21，miR-29a等被发现在胶质瘤来源的外泌体中富集，与抑制细胞凋亡和促进细胞增殖相关。胶质母细胞瘤分泌的EVs能促进促肿瘤生长的细胞因子的生成，增加人星形胶质细胞（NHAs）的迁移能力，NHAs形成类似肿瘤的生长信号，并在软琼脂中形成集落。外泌体通过激活MEK/ERK、PI3K/Akt等信号通路参与促进胶质瘤细胞的存活和增殖。
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