一、拟研究问题青藤碱(Sinomenine,SIN)是一种生物碱单体,是从传统中药青风藤中萃取的化学分子物,具有镇痛抗炎,免疫抑制等多种药理作用,是植物中很强的组胺释放剂,动物实验提示其在休克和器官损伤中有保护作用,临床上已经被广泛应用于治疗类风湿性关节炎和神经痛,疗效确切。
本课题通过一系列方法研究青藤碱对脓毒症模型小鼠的肝肾保护作用,尝试阐述其作用机制,并为临床治疗脓毒症提供一种可能的治疗策略。
二、实验目的1.学习和掌握Western Blot,肝肾组织病理学检查,RT-PCR等技术的原理和实验操作2.熟练掌握脓毒症小鼠模型的建立以及相关动物实验操作3.熟悉科研思路以及科研规范4.了解青藤碱对脓毒症小鼠的肝肾影响,分析出可能的作用机制三、实验方法1.建立CLP脓毒症小鼠模型:盲肠结扎穿刺2.检测肝肾炎症反应:通过RT-PCR的方法,检测肝肾组织中IL-6、IL-1beta;和TNF-alpha;的mRNA表达;通过ELISA试剂盒检测血清中IL-6、IL-1beta;和TNF-alpha;的表达3.组织学病理检查:石蜡包埋,Hh),中心静脉血氧饱和度>70%或混合静脉血氧饱和度>50%。
脓毒症、脓毒性休克初始液体复苏首选晶体液,但大量使用生理盐水可导致稀释性高氯性酸中毒,可选择限氯晶体液,如白蛋白等。
另外还需给予一定的血管活性药物和糖皮质激素等加以辅助,具体的使用视情况而定。
【参考文献】[1]陈作.脓毒症诱导的肠损伤及其防治措施的研究进展.实用医技杂志,2018[2]张先洲,祝红达,孟书舫等.青藤碱凝胶兔体内经皮给药的药动学[J].中国医院药学杂志. 2006[3]张家薇,薛冰,崔正军,郭鹏飞.青藤碱对阿奇霉素诱导的急性肝损伤大鼠的保护作用及机制研究[A].中国免疫学杂志,2018[4]刘溦溦,朱尧,汪悦.青风藤生物碱的活性成分及药理作用研究进展[J].辽宁中医杂志,2016[5]抗晶晶,刘晓宁.青藤碱抗炎作用的新进展[A].中国野生植物资源,2017[6] 张玉萍,姚茹冰,赵智明,蔡辉.青藤碱对胶原诱导性关节炎小鼠肿瘤坏死因子-alpha;、白介素-17及核因子-kappa;B的影响.安徽医药,2018[7]徐文俊.青藤碱对胶原诱导关节炎小鼠IL-35介导JAK/STAT信号通路的影响.2018[8] Gao Tianle,Shi Tiansheng,Wiesenfeld-Hallin Zsuzsanna et al. Sinomenine alleviates mechanical hypersensitivity in mice with experimentally induced rheumatoid arthritis.[J] .Scand J Pain, 2015, 7: 9-14.[9] Yao Ru-Bing,Zhao Zhi-Ming,Zhao Ling-Jie et al. Sinomenine inhibits the inflammatory responses of human fibroblast-like synoviocytesthe TLR4/MyD88/NF-kappa;B signaling pathway in rheumatoid arthritis.[J] .Pharmazie, 2017, 72: 355-360.[10] Zhang Yueyang,Zou Binhua,Tan Yanhui et al. Sinomenine inhibits osteolysis in breast cancer by reducing IL-8/CXCR1 and c-Fos/NFATc1 signaling.[J] .Pharmacol. Res., 2019, 142: 140-150.[11] Xu Feng,Li Qi,Wang Zhiyu et al. Sinomenine inhibits proliferation, migration, invasion and promotes apoptosis of prostate cancer cells by regulation of miR-23a.[J] .Biomed. Pharmacother., 2019, 112: 108592.[12]孙越华,朱清,李俊旭.青藤碱抗炎免疫与抗肿瘤作用研究新进展[A].中国药理学通报,2015[13]吴朝,董晓琴,赵鸿,王贵强.脓毒症及脓毒性休克诊断与治疗研究进展[J].中华实用诊断与治疗杂志,2018,32(11):1126-1128.
资料编号:[374987]
