题目：中药活性成分DME对乏氧状态下Treg细胞分化的促进作用和机制研究（基础研究）一、课题解决的问题溃疡性结肠炎（UC）是一种慢性炎症性免疫相关性疾病，调节性T细胞（Tregs）功能和数目的下调被证实为介导其发生和发展的关键因素。
课题组前期研究发现，UC条件下机体结肠组织处于乏氧状态，中药活性成分DME可上调该条件下结肠组织中Tregs的比例，而机制尚不十分清楚。
基于此，本课题通过建立体外乏氧条件下Tregs的分化模型，考察DME的促进作用，并深入探索机制。
注：实习过程中应学会全面思考，多角度考虑影响因素，熟练掌握实验方法，以便更好地进行后续研究工作。
要求掌握的实验方法如下：淋巴细胞的制备、流式细胞术、Q-PCR、western blotting、免疫荧光和细胞转染等。
二、研究方法、计划和技术路线研究方法及计划：2月27日-3月15日 查阅文献，学习实验方法、撰写开题报告3月15日-5月1日开展实验研究在乏氧状态下培养细胞，流式细胞术测定CD4 CD25 Foxp3 T细胞比例，Q-PCR法测定Foxp3和IL-10 mRNA表达，western blotting法测定Foxp3蛋白表达；在乏氧状态下培养细胞，倒置荧光显微镜成像分析葡萄糖摄取，试剂盒法测定葡萄糖消耗及乳酸产生；在乏氧状态下培养细胞，Q-PCR法测定糖酵解相关酶Glut1、HK2、TPI、PKM、Eno1和Aldolase的mRNA表达； 在乏氧状态下培养细胞，将HK2质粒转染到CD4 T细胞中，流式细胞术测定CD4 CD25 Foxp3 T细胞比例，Q-PCR法测定Foxp3和IL-10的mRNA表达，western blotting法测定Foxp3蛋白表达。
5月2日-5月20日书写毕业论文，准备答辩技术路线： 三、文献综述Treg细胞及其分化机制研究进展摘要：调节性T（regulatory T, Treg）细胞具有较强的免疫抑制作用，参与机体免疫稳态的维持。
近年来，随着对免疫性疾病发生机制研究的深入，靶向Treg细胞已经成为一种新兴的治疗措施。
因此，本文对Treg细胞及其分化相关机制（包括转录因子、信号通路、能量代谢和miRNA等）进行概述。
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