开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 立题背景及研究现状
非酒精性脂肪肝 (Non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD) 是指排除由酒精和其他对肝脏有明确损害致病因素所引起的以脂肪在肝细胞内过度沉积为主要病变特征的临床病理综合征，包括单纯性脂肪肝及与其相关的肝炎、肝硬化。NAFLD发病率呈逐年上升及低龄化趋势，加上病情发展缓慢，极易引发心血管事件及肝癌产生。关于NAFLD的发病机制，国内外学者在“二次打击”学说的基础上更加重视内质网应激（Endoplasmic Reticulum stress，ERS）在NAFLD发生发展中的作用。
近年来研究表明，ERS在 NAFLD的发生发展中具有重要作用。肝细胞内过载的游离脂肪酸触发内质网的未折叠蛋白反应(unfolded protein response，UPR)，并促进胰岛素抵抗、氧化应激和脂质代谢紊乱的发生，进一步介导非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)。作为UPR的三条分支之一，激活的肌醇酶1alpha;/X盒结合蛋白1（inositol-requiring enzyme-1alpha;/X-box binding protein 1，IRE1alpha;/XBP1）通路能激活脂质从头合成相关因子和抑制极低密度脂蛋白的合成与分泌，扰乱肝细胞中脂质的正常合成与分泌，并最终导致肝脏脂质蓄积。因此可通过调控ERS减轻NAFLD的发展，为NAFLD的防治提供科学依据。
灯盏乙素（Scutellarin，Scu）是从灯盏花中提取的一种黄酮类化合物，以往的研究主要关注其治疗心脑血管疾病如心绞痛、心肌梗死、脑血栓等作用。近几年的研究表明灯盏乙素通过上调过氧化物酶体增殖剂激活受体alpha;（peroxisome proliferators-activated receptor alpha;，PPARalpha;）以及下调过氧化物酶体增殖剂激活受体gamma;（peroxisome proliferators-activated receptor gamma;，PPARgamma;）和CCAAT-增强子结合蛋白alpha;（CCAAT/enhancer binding protein alpha;，C/EBPalpha;）表达抑制脂肪细胞的分化；还能通过调节蛋白激酶B (protein kinase B ,PKB)等相关通路改善高脂动物模型的脂代谢，减少肝脏脂质聚集；还有研究证明灯盏乙素有降低胆固醇水平与改善动脉粥样硬化的作用，从而显示出治疗肥胖相关疾病的潜力。为此，本课题拟研究灯盏乙素通过抑制ERS而改善棕榈酸诱导的肝细胞脂质沉积的作用机制。
- 研究内容、拟解决的关键问题及预期成果
2.1研究内容
以棕榈酸（Palmitic acid，PA）诱导人肝癌细胞（human hepatoma cells，HepG2）细胞脂质蓄积模型，考察Scu对NAFLD中内质网应激的作用及潜在机制。检测药物对ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)、IRE1alpha;、XBP1的影响。进一步过表达XBP1s后，检测药物对胞内脂质蓄积水平的影响。
2.2拟解决的关键问题
细胞培养及脂质蓄积模型的建立，免疫印迹法（Western Blot，WB）技术的掌握。
2.3预期成果
（1）研究Scu对PA诱导HepG2细胞GRP78、IRE1alpha;、XBP1的下调效应，阐明其对NAFLD中内质网应激的抑制作用。
