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文献综述
文 献 综 述引言萎缩芽孢杆菌NX-12是一株能够对植物致病真菌具有广谱抑菌活性的生防细菌,微生物丰富多样的次级代谢产物一直都是天然抗真菌剂的重要来源,但现有的筛选手段及分离纯化方法并不足以应付现有物质的分离需要。
首先分离纯化前无法预估活性物质的结构,应用活性追踪法可能拿到的是已有报道的化合物;其次,难以实现高通量筛选,由于活性化合物产量较低,需要大量的发酵液,否则没有足够的化合物用于活性的检测;现有技术手段的局限性,同一种技术手段功能的单一性决定了要进行多次实验才有可能筛选到合适的且不改变物质结构的分离手段。
目前,微生物产生的抗真菌活性物质的分离纯化主要依靠柱层析和制备液相色谱(Preparative HPLC)法分离得到纯品。
纯品的化学结构确定需要通过液质联用(LC-MS),核磁共振(NMR),X-射线单晶体衍射等技术手段综合解析化合物的结构。
针对萎缩芽孢杆菌NX-12的胞外抗菌物质,通过有机溶剂萃取、大孔树脂分离、硅胶柱分离、色谱分离等多种分离技术对保外抗菌物质及逆行初步的分离,结合红外光谱与核磁共振等技术对纯化后的物质进一步鉴定。
1、萎缩芽孢杆菌萎缩芽孢杆菌(Bacillus atro-phaeus)是一种好氧性、革兰氏阳性杆状细菌,在自然界中分布广泛,容易被分离培养,无致病性,可产生抗逆性孢子,是消毒检测以及灭菌、质量控制的生物指示剂[1]。
1.1 萎缩芽孢杆菌次级代谢产物作为分泌次级代谢产物的主要微生物种属之一,芽孢杆菌属中已经有超过 60种产物被发现,而人们也已经从萎缩芽孢杆菌中得到了十几种不同的活性产物。
以这些代谢产物的合成途径为分类依据,可以大致将萎缩芽孢杆菌分泌的物质分为核糖体合成途径合成的代谢产物,非核糖体合成途径合成的代谢产物和其他物质3类。
其中,核糖体合成途径产生的代谢产物主要是细菌素(bacteriocins)、酶类、黑色素和活性蛋白类。
