人外周血中RNA的提取及AR-V7表达水平的检测文献综述

 2023-02-05 08:02

见附件一、拟研究或解决的问题:以雄激素受体剪接变异体7(androgen receptor splice variant 7, AR-V7)的高表达会导致去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer, CRPC)患者对新型内分泌治疗药物阿比特龙、恩杂鲁胺产生耐药性为理论基础,基于液滴微流控技术与液滴数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction, DDPCR)技术,建立一种高灵敏度、高特异性的检测方法,对野生型雄激素受体(Androgen Receptor Full Length,AR-FL)和AR-V7表达水平进行检测。

通过AR-V7与AR-FL/V7表达水平的比值,预测CRPC患者是否会对阿比特龙和恩杂鲁胺产生耐药,为AR-V7作为指导患者用药的分子标志物提供可靠的检测方法。

二、采用的研究手段: 1.外周血RNA提取:采用商业化RNA核酸提取试剂盒进行提取 2.数字PCR体系的建立2.1 引物探针设计,商业化合成2.2 RNA假病毒设计,商业化合成2.3 数字PCR反应体系的构建与优化 2.3.1 原材料采购:一步法probe RT-dPCR 试剂盒,(包括逆转录酶、Taq DNA聚合酶、dNTP、镁离子和PCR缓冲液)2.3.2优化反应条件:引物探针浓度、Taq酶浓度、退火温度。

3.用上步构建的数字PCR体系,检测临床样本中AR-V7的表达量。

4.结果分析与讨论三、文献综述AR-V7在去势抵抗性前列腺癌中的研究进展摘要前列腺癌(PCa)是发生于男性泌尿系统中常见的恶性肿瘤之一,目前临床上常采用雄激素剥夺治疗(ADT)作为晚期PCa患者的治疗方法。

但治疗一段时间后,绝大多数PCa患者逐渐产生耐药性,病情进展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。

研究发现雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)对AR信号通路的激活在耐药性的产生以及 CRPC的进展过程中起重要作用,AR-V7可能成为PCa继前列腺特异性抗原(PSA)后的新的生物标志物。

因此,本文将对AR-V7在CRPC中研究进展及其检测方法的做一综述。

关键词前列腺癌;雄激素剥夺治疗;全长雄激素受体;雄激素受体剪接变异体7;前列腺特异性抗原;雄激素受体信号通路1 引言前列腺癌(prostatic cancer, PCa)是发生于男性泌尿系统中的上皮性恶性肿瘤,此癌种的发生率在男性所有恶性肿瘤中占有较高比例,是男性癌症死亡的主要原因之一。

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