基于PCR技术的检测体系构建及在AML中的初步应用文献综述

 2023-02-05 08:02

PCR体系的构建及其在AML中的应用课题性质 应用课题 一.研究课题及其针对问题本课题旨在建立对于AML中常见的FLT3基因突变的检测的技术体系,以便于更加准确,方便,快速的测定AML患者 FLT3基因内部是否存在串联重复突变。

二.研究方法 本课题使用PCR技术,目前FLT3突变的检测方法是PCR技术,由于研究的深入进展,FLT3基因序列已知,并且其大部分转录产物也得到分析。

我们通过查找文献,在基因序列中找出与FLT3基因突变密切相关的序列,由此确定PCR扩增的区域,在其上游与下游设计一段引物序列,待PCR扩增完成后,我们可以通过毛细管电泳技术分析扩增产物长度,与野生型长度进行对比,以此确定样品FLT3是否发生突变。

另外还需使用基因测序的技术,如Sanger测序,来验证所得结果是否准确。

其中包含的研究方法有计算机引物设计,PCR扩增技术,毛细管电泳法,Sanger测序法(外包)。

三.文献综述1.背景急性髓系白血病 (acute myeloid leukemia,AML)是一组以造血干细胞增殖失控,分化受阻,同时抑制正常造血为特点的异质性造血系统恶性疾病,即使AML 患者预后良好,也仍有 40%的患者复发,5 年以上长期生存率不足 50%。

随着研究深入,目前研究目光逐渐聚焦在癌细胞信号转导系统上,酪氨酸激-3(FLT3激酶)结构的改变常常是导致AML的主要原因。

目前认为,此酪氨酸激酶结构的改变是由于FLT3基因突变导致的。

因此检测FLT3的突变可以指导临床用药,尤其在靶向药物方面有着非常重要的作用。

目前FLT3的一种常见突变为内部插入长度不等串联重复序列,称为FLT3-ITD。

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