本课题拟在前期研究基础上，初步确定益气复脉粉针抑制氧糖剥夺诱导的PC12 细胞凋亡的作用，为探讨益气复脉散对脑缺血再灌注的作用机制提供参考依据。
采用研究的手段1、PC12 细胞的培养 PC12 细胞复苏后，用含有10%胎牛血清（FBS）的DMEM 培养基培养。
待培养瓶中细胞长满80%，弃去培养液，加入2mL PBS 轻轻荡洗，弃去荡洗液，加入2mL 0.125% 胰酶溶液，消化细胞50s，弃去消化液并加入含有10%胎牛血清DMEM 培养基终止消化，加入4mL 10% DMEM 培养基，轻轻吹打成单细胞悬液，传代于新的培养瓶中，于37℃、5% CO2培养箱中培养。
2、OGD诱导PC12 细胞凋亡模型的制备 PC12 细胞培养48h后，在无菌操作台吸净培养基，用缺氧缺糖DMEM培养液洗涤细胞3次，并用该液体孵育细胞，将培养板快速放入1% O2、5% CO2、 37℃细胞培养箱中分别培养6 h、12 h、24 h；。
3、MTT比色法检测细胞活力 实验设定空白对照组、益气复脉给药组（400 mu;g/mL）、无氧无糖组，每组5个复孔，在37℃，5% CO2 条件下培养24 h，成融合状态。
各组细胞处理完毕后，PBS 洗涤细胞两次，加入0.5 mg/mL MTT工作液，37℃，5% CO2 条件下孵育3 h，除去培养液，每孔加入用150 mu;L DMSO溶解结晶，测定每孔的OD值（测定波长570 nm，参比波长650 nm）。
4、PC12 细胞形态的观察 各组细胞处理完毕后弃去培养基，以预冷PBS 洗两次，采用倒置显微镜观察各组细胞形态变化。
5、PC12 细胞总蛋白的提取及Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白 等量加入细胞裂解液后，提取PC12 细胞的蛋白，4℃裂解30 min。
离心去上清液。
用BCA蛋白试剂盒测定蛋白质的含量。
