一、课题的研究背景、意义和目的
蚕丝是最早被人类利用的动物纤维之一，主要由丝素蛋白和丝胶蛋白两部分组成，其中丝素蛋白是蚕丝的主要组成部分，约占其重量的70%。丝素蛋白具有良好的柔韧性和抗拉伸强度、透气透湿性、缓释性等机械性能和理化性质。随着生物技术的发展，丝素蛋白在生物医用材料、医药、食品等诸多方面得到广泛应用，已经成为一种新型的蛋白质资源。随着对丝素蛋白研究的不断深入，丝素肽的功能以及应用潜能也逐渐被挖掘出来。研究表明，丝素肽在降低血液胆固醇、抗菌、促进胰岛素分泌、防治帕金森氏症、降血压等诸多方面具有广泛的应用前景。最新研究表明，丝素肽可能对神经细胞的损伤具有一定的保护作用。
阿尔茨海默病（Alzheimer diseases, AD），又称为早老性痴呆、老年性痴呆或老年前期痴呆，是最常见的痴呆症之一。在临床上，主要表现为认知功能受损、学习能力和行为能力的逐渐下降。二十世纪以来，随着全球老龄化程度的加剧，AD的患病率逐年攀升，严重危害着人们的健康和生活。因此，AD相关的发病机制、预防措施及治疗方案逐渐受到人们的重视。AD有两个显著病理性特征，分别是神经细胞外的老年斑（senile plaques, SPs）和神经细胞内的神经纤维缠结（neurofibrillary tangles, NFTs）。其中SPs主要由于beta;-淀粉样蛋白（Abeta;）的异常沉积引发，NFTs主要由过度磷酸化的tau蛋白聚集而成。研究表明，Abeta;能够显著上调脑内RAGE水平，通过RAGE信号转导途径引起神经元损伤。另外，RAGE可结合外周循环中的Abeta;，破坏血脑屏障，将其转运至脑中。另一方面，在AD患者脑中，tau蛋白发生过度磷酸化，聚集产生NFTs，破坏神经元微管稳定性，损伤轴突转运，最后引起神经元死亡及认知能力损伤，因此异常磷酸化的tau蛋白是导致AD发生的关键分子。
本课题将在实验室前期已筛选出的丝素蛋白水解产物中神经保护活性较好的丝素活性肽（命名为神经活性肽NP）的基础上，初步探讨神经活性肽NP对神经细胞凋亡的影响。建立神经细胞损伤模型，采用神经活性肽NP进行干预，考察神经活性肽NP对神经细胞凋亡的干预作用，同时探讨神经活性肽NP对凋亡相关蛋白及分子通路的影响，以期为神经活性肽NP防治AD的应用提供实验和理论基础。
二、课题研究的主要内容
1. AD样细胞模型的建立及神经活性肽NP的干预作用
1.1建立AD样细胞模型并确定给药浓度
以不同浓度的Abeta;25-35损伤SH-SY5Y细胞，48h后MTT法测定细胞活性，根据实验结果选择最佳造模浓度，建立SH-SY5Y细胞损伤模型。
以造模浓度的Abeta;25-35损伤SH-SY5Y细胞，同时以不同浓度的神经活性肽NP进行干预，48h后MTT法测定细胞活性，考察神经活性肽NP对Abeta;25-35损伤SH-SY5Y细胞的干预作用。
1.2检测神经活性肽NP对细胞模型AD样病变的影响
