1、立体背景及研究现状
肝脏是脂质代谢的重要场所,当肝细胞脂质代谢平衡失调时则会导致肥胖、脂肪肝、Ⅱ型糖尿病等多种慢性代谢性疾病的发生。非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是非酒精因素导致的、以肝实质细胞内脂肪异常堆积和脂肪变性为主要特征的肝脏疾病,是目前最为常见的慢性疾病之一,近年来发病逐渐呈现年轻化趋势。在环境、饮食等因素的影响下,NAFLD有可能由单纯性脂肪肝演变为非酒精性脂肪肝炎、肝硬化甚至肝细胞癌。
脂毒性学说认为,过量的游离脂肪酸 (free fatty acids,FFAs) 进入肝细胞会造成脂毒性损伤。棕榈酸(palmitic acid, PA)是饱和脂肪酸家族的重要成员之一,是血脂是重要的组成成分。研究表明,棕榈酸可通过损伤线粒体氧化呼吸链的正常功能,导致细胞发生氧化应激反应;进一步激活炎症小体,导致肝细胞发生炎症反应,促进NAFLD的发生。棕榈酸在诱导肝细胞脂质代谢障碍、制备细胞学模型和动物模型方面已有较多应用。
细风轮菜( Clinopodium gracile ( Benth.) Matsum) ,别称剪刀草、瘦风轮、玉如意、节节花等,为一年生唇形科风轮菜属草本植物,具有清热祛风、止痛消肿、行气活血的作用,主要用于咽喉肿痛、感冒发热等。研究表明其具有良好的抗氧化、抗炎、降血糖血脂等药理作用。本课题通过建立PA诱导的NAFLD脂肪变性细胞模型,研究CGE对肝细胞脂质合成信号通路的影响并探讨其作用机制,为将其开发成为改善非酒精性脂肪肝的药物提供一定的实验依据。
2、研究内容、拟解决的关键问题及预期成果
2.1研究内容
1)研究CGE对PA 诱导的肝脏细胞脂肪变性的影响
采用饱和PA诱导人源肝癌细胞系(HepG2)建立体外非酒精性脂肪肝脂肪变性细胞模型,加入CGE探究其预保护的作用。主要通过油红染色及甘油三酯和总胆固醇的含量测定研究CGE对NAFLD模型细胞内脂质堆积的影响。
2)研究CGE对PA诱导的肝脏细胞的脂质合成信号通路的影响
采用Western Blot检测 NAFLD模型细胞中脂肪酸合成相关蛋白FAS、CD36、SREBP-1c的表达。
