使用定量甲基化特异性PCR对胰腺beta细胞损伤的早期诊断文献综述

 2023-01-15 03:01

拟研究或解决的问题:在急性胰腺炎,胰腺癌和I型糖尿病的发病过程中,由于胰腺beta细胞受损,含有胰岛素基因的DNA释放到血液中。

如果能建立一种分析手段,在这些疾病的早期就能通过检测这些游离的核酸而进行相应诊断,则可以为病人及时治疗争取时间。

采用的研究手段:通过甲基化特异性引物设计,或者联合甲基化特异性限制性内切酶,建立定量甲基化特异性PCR (qMSP, quantitative methylation-specific PCR),检测人体和小鼠体内的脱甲基化水平,从而在胰腺beta细胞损伤的早期可进行检测,最终应用于I型糖尿病、胰腺炎、胰腺癌的早期诊断。

通过参考以往研究经验,在实验过程中不断摸索,建立成熟的qMSR方法,并应用于小鼠STZ诱发的糖尿病模型和新发I型糖尿病病人进行方案验证。

文献综述:DNA甲基化对胰岛素表达的调控及使用PCR方法对I型糖尿病beta细胞损伤的早期诊断1 胰岛素基因的表达是由DNA甲基化调控的 胰岛素是体内代谢平衡的重要调控因子,由胰腺beta;细胞在营养物质的刺激下分泌。

在胰腺的胚胎发育早期,胰岛素基因已经开始表达,并且在整个成年中都保持严格的调控。

小鼠基因组含有两个胰岛素基因,Ins1(GeneID: 16333)和Ins2 (GeneID: 16334)。

Ins2基因具有更加复杂的结构,而且功能上与其他的哺乳动物胰岛素基因更加相似。

而Ins1基因只拥有Ins2和其他哺乳动物胰岛素基因中2个内含子的一个,所以被认为是一种功能性的反转录子 。

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