课题背景：
胸腺肽a1(Ta1)是一个有着广泛临床用途的多肽分子。1961年J.F.A.P.Miller[1] 、R.AGood[2]以及他们的同事发现了胸腺在免疫过程中起到的至关重要的作用。随后，A.L.Goldstein 和A.White[3]在基于胸腺的研究中分离出了胸腺肽。而对胸腺肽的进一步纯化又分离出了胸腺素组分5(TF5)[4] 。TF5具有非常高的免疫调节活性[5]，是多种分子量小于15000 道尔顿的酸性多肽的混合物。1974 年，在第一批接受TF5治疗原发性免疫缺陷性疾病的患者中，他们体内的T细胞的数量有所增加、功能有所恢复，呈现出改善的临床效果[6,7]。这一结果促使TF5 被进一步纯化: 1977 年，Ta1的完整化学特征和合成途径被攻克，当然这也包括许多其它胸腺肽。有意思的是，在促进T细胞的形成和功能方面，Ta1 的活力是TF5的10-1000倍[8]。
Ta1是一个高度保守的含有28个氨基酸的多肽，其氨基端呈乙酰化[9]。Ta1的分子量为3108 道尔顿，等电点为4.2[15]。Ta1的生物学效应包括:降低末端脱氧核苷酸转化酶TdT活性，增强NK细胞功能，增强骨髓干细胞Thy1的表达，抗微生物或者病毒的感染，促进CD3﹢，CD4-，CD8 细胞的增生，拮抗糖皮质急速和抗CD3诱发的细胞凋亡，增强细胞因子（IL-2等）高亲和力受体的表达，增加CFU前体细胞数目等[10]。
IgG是一种由浆细胞分泌并释放入血的，在血液中含量最高的一种抗体。IgG抗体由四条多肽链组成，分子量可达到150kDa，其中重链50kDa，轻链25kDa左右。IgG经木瓜蛋白酶水解后可以得到2个Fab片段，和一个Fc片段[11]。其中，Fc片段可以和细胞表面受体（FcR）和一些蛋白分子相互作用，从而达到延长人体内免疫球蛋白的血浆半衰期的作用。
Fc片段中包含有CH2结构域和CH3结构域，前者可以介导抗体介导的细胞毒作用（ADCC）。后者是Fc片段与细胞表面结合的受体the neonatal Fc recptor（FcnR）[12]。胸腺肽a1与CH3结合后，可以使融合蛋白的分子量增大，从而逃避肾脏的清除作用，进而达到延长融合分子在体内的半衰期的作用[13]。另一方面，CH3结构域上的相关位点与中性粒细胞，巨噬细胞的受体结合之后们可大大增强吞噬细胞的吞噬作用，从而达到增强融合蛋白的免疫效力的作用。同时，仅保留Fc片段的CH3结构域，可以帮助该重组蛋白更好的进入一些微小的结构体中发挥作用。且未糖基化的片段可以更好的在大肠杆菌等宿主细胞中表达，易于得到[14]。
实验方案设计：
1.Ta1-CH3结构域融合蛋白的诱导表达
1.1菌种的复苏以及化平板
将含有pET28a质粒载体的 BL21大肠杆菌菌种转接到含有Kan终浓度为50mu;g/m,30mL LB 液体培养基中，于37℃，200rpm摇床上培养12~14h
