开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 课题研究背景、意义及目的
肝素酶（heparinase）是指一类能够特异性裂解肝素和硫酸乙酰肝素主链糖苷键的酶，已经应用于制备低分子肝素（Low molecular weight heparin , LMWH）、肝素分子的结构测定和体外循环中清除肝等众多领域。但目前只有肝素黄杆菌和环状芽孢杆菌的肝素酶基因得到了克隆和表达，而商品化的肝素酶都来源于肝素黄杆菌。因此，肝素酶的高效生产技术研究是备受关注的研究课题；但由于传统的肝素酶生产主要采用肝素黄杆菌,生产效率低和分离纯化过程的复杂，导致肝素酶成本高,限制了肝素酶的应用。肝素黄杆菌同源表达肝素酶的载体构建研究直到最近才有进展,因此肝素酶的异源重组表达是替代肝素黄杆菌生产HepⅠ的有效可行方案；而依靠基因工程手段直接在细菌中表达出的肝素酶水溶性差，阻碍了蛋白复性，所以构建能高效表达且易于分离的肝素酶的工程菌株成为了研究的热点。
本实验目的是摸索出能够重组表达可溶性肝素酶的表达菌株，使其能够高效表达肝素酶融合蛋白。
二、课题研究的主要内容
通过从肝素黄杆菌（Flavobacterium heparinum）中提取肝素酶基因，与融合伴侣GST结合重组入大肠杆菌中生产可溶性的融合肝素酶Ⅰ，并且通过GST亲和层析柱纯化蛋白并测定其活性。
三、论文研究的进展计划
2019/02---2019/03 查询、阅读整理文献，设计实验方案，进行必要的实验技能训练
2019/03—2019/05 构建重组工程菌并发酵表达目的蛋白，提取纯化后测定酶活
2019/05—2019/06 整理实验记录、撰写毕业设计、准备毕业答辩
- 文献综述：
重组肝素酶工程菌研究
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