开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
课题研究的目的和意义：
肝素酶是一种主要从肝素黄杆菌中提取纯化得到的，能特异性裂解肝素和肝素衍生物中部分糖苷键的裂解酶，分为肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ和肝素酶Ⅲ，可用于制备低分子量肝素 (LWMH) 和超低分子量肝素 (ULMWH)。肝素酶选择性地剪切肝素中葡萄糖胺和糖醛酸之间的alpha;1-4 糖苷键，3种肝素酶有不同的底物特异性，并且专属性非常强。利用肝素酶对肝素进行的酶法裂解生产 LMWH 具有反应条件温和、专一性高、不易带入其它杂质的优点，还能较好地保持肝素分子的结构性特征。肝素酶稳定性差、不易提纯，因而目前市场上肝素酶的价格昂贵。
本课题的目的是摸索一条经济简便的从肝素黄杆菌中分离纯化肝素酶的流程，并制备一定量的电泳纯肝素酶，以备实验室后续使用肝素酶对达肝素钠(LWMH)进行进一步裂解后对其进行结构分析。
研究的主要内容：
通过羟基磷灰石静态吸附除杂和Sephacryl 300 分子排阻层析两步法分离纯化，最终得到电泳纯肝素酶Ⅰ。同时为评价肝素酶纯化过程各步纯化效果，建立了天青 A 法以监测纯化过程中肝素酶的活性。
研究进度安排：
2019.2——2019.3 查询阅读文献资料，设计实验方案及肝素黄杆菌的培养
2019.3——2019.4 对肝素酶进行分离纯化，测定酶活
2019.4——2019.5 对实验方法完善，整理实验记录及撰写毕业论文
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