重组人表皮生长因子基因工程菌高效表达研究文献综述

 2022-12-09 02:12

1.选题目的意义及国内外进展

1.1研究目的

表皮生长因子(Epidermal growth factor简称EGF)是Cohen.S于1962年在研究神经生长因子时发现的,最初发现该因子具有促使新生儿睁眼及萌芽的作用,Cohen等两位科学家也因对EGF的发现及研究作出巨大贡献被授予1986年诺贝尔医学和生理学奖。1975年从人尿中提取表皮生长因子(human EGF简称hEGF),由于其可抑制胃酸分泌,又称为抑胃素。

人表皮生长因子是一种由53个氨基酸构成的多肽,等电点(PI)为4.6,分子量为6045Da,含有3个链内二硫键[1],活性中心位于48-53个氨基酸残基之间。人EGF(hEGF)最早从尿中获得,其生物学活性、理化特性及氨基酸序列都与EGF极其相似,尽管二者氨基酸序列有所不同(二者氨基酸组成有70%的同源性),但都能与EGF受体结合,虽然二者结合位点相同,但抗原位点不同[2]

人表皮生长因子具有多种生物学活性,可促进皮肤和角膜的修复,调控肿瘤细胞的合成,保护应激性溃疡等[3]。由于表皮生长因子具有的多种生物学活性,故其被广泛用于临床治疗各种疾病,如:治疗消化道溃疡及口腔溃疡,促进创面愈合,抗肿瘤等。EGF 的临床应用有着广泛前景,其相关基础及临床研究也得到了极大地重视。

在本次实验后确定的优化条件可应用于以后的实验条件中,降低生产人重组表皮生长因子的成本,提高目的产物的产量,惠及临床治疗的众多患者。

1.2研究意义

对培养基的优化方案研究主要通过正交实验设计方法对碳源、氮源等培养基成分的含量,以及发酵培养过程所需的适宜接种量,诱导剂含量,培养时间等因素进行条件探究。

对经预处理[4]后的人表皮生长因子粗品进行进一步提纯时,对盐析浓度、层析条件等各个影响因素设置不同的数值条件[5],通过经不同条件处理后的蛋白进行含量和活性的测定,确定最终发酵液分离纯化的最适条件。

1.3国内外研究现状

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