大孔吸附树脂固定化核酸酶P1的应用研究文献综述

 2021-09-27 12:09

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一.核酸酶核酸酶Pl[1](EC3.1.30.1)是一种含锌金属酶,由桔青霉(Penicilliumcitrinum)发酵制得,可以水解RNA和热变性DNA的磷酸二酯键而得到5-核苷酸和5-脱氧核苷酸。

脱氧核苷酸在临床上主要用于医治白血球细胞减少症,对再生障碍性贫血、血小板减少、肝炎等病症也有较好的疗效。

广泛应用的生物工程试剂脱氧核苷三磷酸是脱氧核苷酸通过酶催化磷酸化得到的,脱氧核苷酸由脱氧核糖核酸酶水解得到的5一脱氧核酸是合成脱氧核酸类药物的重要原料,用核酸酶Pl催化水解热变性DNA制取脱氧核苷酸是制备这类药物的有效方法之一。

早在50年代,国外就开始从蛇毒或小肠粘膜中提取核酸酶P1用于生物核苷酸;60年代开始,一些国家用微生物发酵的方法生产核酸酶P1获得成功;随着蛋白质提纯技术的发展和晶体学在生物学中的应用,人们对该酶蛋白的分子结构和活性中心有了更多的了解,同时也进一步扩展了核酸酶P1在食品、医药、以及分子生物学等方面的应用前景[2]。

核酸酶P1的结构和酶学特性的研究,对于发展我国核酸酶工业有着重要的理论和现实意义.文章主要研究大孔吸附树脂固定核酸酶P1二.常见固定酶的方法在实际生产中,使用游离酶存在着生产成本高、酶自身不稳定、回收困难等缺点,所以酶催化技术在工业中的应用,在很大程度上取决于酶的固定化。

固定化核酸酶技术的成功与否,是利用核酸酶进行合成和转化得以工业化应用的关键,因此固定化技术一直是学术界和工业界的接触点和共同热点之一,固定化酶是酶工程的核心内容之一,近年来引起人们极大的关注[3-5]。

酶的固定化是通过物理或化学方法,使游离酶转变为在一定空间内其运动受到完全约束、或受到局部约束的一种不溶于水,但仍具有活性的酶。

它能以固相状态作用于底物,进行催化反应。

与游离酶相比, 固定化酶的两个最大的优点是酶易与产物分离,可重复使用。

另外,固定化酶可以较长时间内重复酶解反应,反应条件和储藏条件都比游离酶范围要宽, 从而提高酶的使用效率, 增加产物收率, 降低生产成本。

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