TG酶检测方法的研究与优化文献综述

 2021-09-25 08:09

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文 献 综 述内容提要:谷氨酰胺转胺酶能催化蛋白质分子内或蛋白质分子间的交联,从而改变各种蛋白质的功能性质,对蛋白质的性质如:发泡性,乳化性,乳化稳定性,热稳定性、保水性和凝胶能力等效果显著,进而改善食品的风味、口感、质地和外观等。

在食品、化妆品、制药等工业领域具有广阔的应用前景。

近期,少盐少磷酸的食物被广泛推广,但其质地和物理性质都不尽如人意。

选择适宜的培养基成分,优化微生物谷氨酰胺转胺酶发酵生产的各种培养条件,找出影响微生物合成谷氨酰胺转胺酶的关键因素是重点。

本报告着重于TG酶检测方法的研究及优化。

关键词:TG酶 检测优化氧肟酸比色法1.TG酶检测背景:目前常用的TG酶方法[1]大致有以下几类:直接测定法,通过测定特定蛋白或多肽底物交连后物理特性的改变来度量酶活的大小,如荧光法等;间接测定法,反应产物与其他物化合后,测定形成的特定产物,间接测定酶活[2]大小,如氧肟酸比色法,胺法,酶联比色法;各种检测方法各有优劣,根据要求的精度,经费等条件选择不同的检测方式才能达到最好的效果,本实验着重讨论氧肟酸比色法的研究与优化。

2.TG酶检测方法TG酶检测各种方法多种多样,各有千秋:黄六容,何冬兰,刘梅芳[3](中南民族大学生命科学院)使用蛋白凝胶絮凝法检测TG酶,从实验[4]结果可以看出此方法在实际应用中方便快捷、价格便宜;但由于絮凝成胶聚合物无法准确定量,在使用常常出现假阳性,所以该法只能用于初步的定性检测。

Lorand L[5]等,Thomas M[6]等使用荧光法检测TG酶,从实验中可以看出此方法测定的优点是灵敏度提高,它比普通的光吸收要高2-3个数量级,特别适于酶量级低时的快速酶反应分析,其主要缺点是荧光读数与浓度间没有直接的比例关系,而且常因测定条件如温度、散射、仪器等而不同。

Grosswicz[7]等使用氧肟酸比色法测定TG酶,确定了实验条件,这是最常用的经典方法,重复性好。

Susan M.T[8]等使用酶联比色法检测TG酶,采用生物素多肽(biotin-TVQQEL)结合到酪蛋白上作为底物,生物素多肽通过添加抗生素蛋白氧化酶及四甲基联苯胺进行显色。

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