CRISPR/Cas9 技术在构建裂殖壶菌尿嘧啶营养缺陷型菌株中的应用与研究文献综述

 2021-10-23 09:10

毕业论文课题相关文献综述

文献综述1.裂殖壶菌体内基因工程的研究进展DHA 是大脑和视网膜组织中细胞膜的组成成分,在脑细胞形成的过程中,对婴儿大脑正常发育和成人大脑功能的正常发挥有着非常重要的作用,具有增强视力[1]、预防高血压[2]、抗炎、抗癌[3]等功效。

通过微生物发酵提取 DHA 和 EPA 成为了新的生产渠道,而裂殖壶菌就是一株高产DHA的海洋真菌。

裂殖壶菌的油脂通常占干重的 70%以上, DHA 含量可达到总油脂的 40%-60%。

此外, 不同于自养型的微藻,裂殖壶菌具有生长周期短,培养条件要求低,PUFAs 含量高等特点[4]。

目前国内外的研究主要集中在利用发酵法和菌株驯化的方法利用裂殖壶菌高效生产 DHA,孙小曼等利用高转速和低浓度过氧化氢连续驯化菌种的方法,通过连续高氧驯化40天筛选获得了一株高产菌株,成功的改变了菌种对氧的敏感程度,其生物量比出发菌种提高了32.4%,DHA百分含量在高氧环境也高达52.52%[5]。

裂殖壶菌中PUFAs如DHA和EPA的产量强烈依赖于环境因素如温度、盐度和培养基组分。

Zeng等采用两步发酵法对裂殖壶菌进行发酵培养,首先将裂殖壶菌在30℃培养32 h,随后在20℃的低温下继续培养从而成功的使DHA占总油脂的含量提高了51.98%[6]。

上述工作都是通过发酵法、菌株驯化的方法来改造裂殖壶菌的生理特性以高产目的产物,而通过基因工程提高DHA油脂含量也是必须关注的方面。

目前在裂殖壶菌中展开的基因工程的工作有限,Ben Zhao [7]等人尝试通过ARTP诱变系统随机诱变裂殖壶菌来筛选高产DHA的裂殖壶菌突变菌株,其获得的突变菌株产量达到14g/L。

但随机突变的方法存在着工作量巨大且突变方向不确定等缺点难以推广。

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