分子动力学研究不同压力对葡萄糖氧化酶结构的影响文献综述

 2021-10-21 05:10

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文 献 综 述1.葡萄糖氧化酶 1.1葡糖糖氧化酶的概念葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,简称 GOX)是一种黄素依赖型蛋白,属于葡萄糖 /甲醇/胆碱氧化还原酶家族。

系统名为6-脱氧-D-葡萄糖:氧化还原酶(EC1.1.3.4),它能专一地催化6-脱氧-D-葡萄糖与氧气反应,生成葡萄糖酸和过氧化氢[1,2],对 2-脱氧-D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖等底物只有较低的催化活性。

最早发现于 20 世纪初, 自1928 年Muller[11]在黑曲霉的细胞提取液中首次发现葡萄糖氧化酶,人们先后在扩展青霉(Penicillium expansum)、黄色蠕形霉(Talaromyces flavus)、变幻青霉(Penicillium variabile)等多个真菌中也发现葡萄糖氧化酶,因此该酶通常被认为是一种真菌酶[3]。

中国于20 世70 年代成立了葡萄糖氧化酶研究协作组。

葡萄糖氧化酶的晶体呈淡黄色,易溶于水,不溶于乙醚、甘油、乙二醇等有机溶剂。

同时葡萄糖氧化酶安全无毒, 于2013 年农业部将饲料级葡萄糖氧化酶生产菌株限定为青霉菌(Penicillum)和黑曲霉菌(Aspergilus niger) [31]。

其在自然界的微生物、植物和动物体内中都有存在,广泛应用于酿酒、医疗、牙膏、食品、饲料、纺织漂白、生物燃料等领域[53]。

从分子机理方面来说,葡萄糖氧化酶能够以分子氧为电子受体,将葡萄糖催化成葡萄糖酸内酯与过氧化氢(H2O2)[32],在此过程中葡萄糖酸内酯不依靠酶类直接形成葡萄糖酸,同时葡萄糖氧化酶中的辅基核黄素-5'-腺苷二磷酸(FAD)接受电子还原成还原型核黄素-5'-腺苷二磷酸(FADH2),还原型核黄素-5'-腺苷二磷酸与氧分子反应之后,被重新氧化成核黄素-5'-腺苷二磷酸,并生成H2O2[33]。

图 1-1 GOX 催化反应过程图[33] Figure 1-1 The GOX reaction[33]葡萄糖氧化酶为二聚体分子结构,有两个亚基,由二硫键将其相连在一起,每个亚基上包含了 583 个氨基酸残基,一个非共价键结合的 FAD 辅因子,五个 N-乙酰氨基葡萄糖分子,三个甘露糖残基和 309 个溶剂分子,单个亚基的分子量大小约为 70KD80KD,每个亚基结合一个 FAD 分子,因此每个酶分子含有两个 FAD 结合位点。

FAD 结合位点,β-D-葡萄糖结合位点,FAD 与亚基以非共价键形式结合。

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