Rv364和Rv365基因的分子克隆及表达文献综述

 2023-02-18 07:02

Rv364和Rv365基因的分子克隆及表达

一、研究内容

1.目标基因的引物设计

2.分子克隆

3.构建目的基因的连接产物并表达,蛋白质的初步研究

分子克隆技术是本实验需要重点攻克的难题,它是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。将目的基因用体外重组方法将它们插入克隆载体,获得连接产物,通过转化与转导的方式,引入适合的宿主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的宿主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。

它包括PCR引物设计,以及PCR产物回收,酶切连接,质粒提取,大肠杆菌感受态转化等。很多环节会影响实验的成败,如酶切的好不好、回收的质量好坏、连接时的浓度或比例、感受态等。

二、研究方法与技术路线

根据目的基因序列进行引物设计

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