PTICE对HUVEC细胞增殖的影响（MTT）
一、研究背景：
慢性肾衰竭(chronic renalfailure CRF)是指肾损伤后，肾单位发生进行性破坏，在数月、数年或者更长的时间后，残存的肾单位不能充分排出代谢废物和维持内环境的稳定，从而体内出现代谢废物的潴留，水、电解质与酸碱平衡紊乱以及神内分泌功能的障碍。心肾综合症（cardiorenal syndrome）是由于慢性肾功能衰竭（chronic renal failure， CRF）引起的心血管并发症（Cardiovascular complication），是肾衰患者死亡的一项重要因素，慢性肾衰后期出现心力衰竭，患者的病死率升高，且与其肾功能的恶化程度密切相关。随肾衰病程进展，心脏负担逐渐加重，动脉血管内皮损伤及心肌舒缩功能损伤是导致心力衰竭的重要因素，成为肾衰并发症死亡的重要诱因之一。
血管内皮细胞是位于循环血液与组织液之间的单层扁平上皮细胞，不但构成了血管通透性的主要物理屏障，而且是一种十分活跃的多种功能的内分泌细胞，通过合成、释放多种血管活性物质，在维持血管壁的完整性、调节血管张力、血小板活化和聚集、血管壁重塑等方面具有重要作用 。内皮功能长期影响着血管的细胞修复，一旦血管内皮细胞受损，则必然影响甚至破坏血管内皮的正常功能，引起各种与血管有关的疾病。因此，深入探讨血管内皮细胞损伤与修复的机制，对预防和治疗多种内皮细胞损伤诱发的心血管疾病有着积极意义。
I型胶原蛋主要是分布在皮肤、骨骼、肌腱、血管壁和牙齿等部位，并且广泛分布于结缔组织的间质中，其主要功能是为组织提供一种机械支撑，并维护器官与组织的完整性，赋予组织张力，I型胶原在骨骼与结缔组织中可形成和保持骨架的完整性。除此生物力学作用之外，I型胶原在特定的细胞微环境中，具有传递细胞外信号、截留与运输生长因子、参与组织反馈调节等一系列功能，在细胞分化与发育、免疫调节、肿瘤转移、关节润滑、钙化作用、血液凝固、伤口愈合与组织修复中起着重要作用。
河豚I型胶原蛋白提取物(PTICE)是从人工繁殖东方暗纹河鲀 (fuguobscurus) 提取的。研究表明，鱼胶原肽不仅能提供生长发育所必需的营养物质，而且往往同时具有降压、抗氧化、改善关节炎及骨质疏松症、抗肿瘤、提高免疫力、抗血栓等多种活性。
MTT检测法主要反映细胞的能量代谢，是检测细胞增殖活力的一种简便、准确的方法，其原理是活细胞在其生长和增殖过程中，线粒体内的琥珀酸脱氢酶可将黄色可溶性的MTT分解成蓝紫色的结晶并沉积在细胞中，死细胞无此功能。MTT结晶形成的量与细胞的数量和细胞的活性成正比，将其溶解在有机溶剂里，在一定波长范围内，通过比色分析以反映成活细胞数及细胞的活性。
在本实验中用5/6肾切大鼠血清对人脐静脉内皮细胞进行损伤处理，给予PTICE 0.3mu;g/ml、1mu;g/ml、3mu;g/ml、10mu;g/ml进行治疗，以观察PTICE对人脐静脉内皮细胞的增殖的影响。
二、研究方法：
MTT法测细胞活力：
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