【研究的主要目的和意义】在进行常规的微生物限度检查之前，必须验证在试验条件下，所检测的样品及检验程序不得对可能存在的各类微生物生长产生抑制作用。
如若产生抑制作用，应采用薄膜过滤法、培养基稀释法及离心法等消除样品的抑菌作用的方法中选取适宜的方法应用于样品的检验。
利巴韦林是一种新型非选择性核苷类广谱抗病毒药，属单磷酸次黄嘌呤核苷(IMP)脱氢酶抑制剂，在人体内参加鸟嘌呤代谢，干扰鸟嘌呤的生物合成，阻止病毒的复制，对多种DNA和RNA病毒均有抑制作用。
本人实习所在公司的微生物实验室曾依据2010年版《中国药典》附录XI，建立了利巴韦林颗粒50mg的微生物检查的检验方法，并对该方法进行了验证。
但在《中国药典》2015年版微生物通则拟增修订草案中，计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验中所使用的培养基及结果判断的方法较2010年版《中国药典》中的有所变化，因此现依据《中国药典》2015年版微生物通则拟增修订草案1105，重新建立利巴韦林颗粒50mg的微生物检查的检验方法，并对该方法进行验证，为检验结果的准确性及可靠性提供有力的保障。
【采用的研究手段及文献综述】验证是用微生物恢复生长的比较而确定的，本方案的制定同时满足：在检验前样品的预处理方式能有效消除样品的抑菌作用和检验过程、预处理方式、培养条件等不会影响样品中的微生物生长两个前提下，将试验用菌株稀释50~100cuf/ml后，试验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值与菌液对照组菌数的比值应在0.5~2范围内，则原样品可采用此方法进行日常检验。
1.菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30 ～35℃，培养时间18～24 小时，用pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。
接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养基，培养温度20 ～25℃，培养时间2 ～ 3天，用pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基，培养温度20～25℃，培养时间5～7天，或直到获得丰富孢子。
