开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究背景
宫颈癌(cervical cancer)在全球妇女恶性肿瘤发病率排第二，仅次于乳腺癌，是妇科最常见的生殖系统恶性肿瘤，严重威胁女性人类的健康和生命[1]。有统计显示，世界每年宫颈癌新发病例约 50 万例，而中国宫颈癌新发病例每年超过13万，占全球的1/4～1/3。近些年来，宫颈癌的发病率有明显上升和年轻化趋势，发病率以每年2% ~ 3%的速度增长。
人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV）为体积较小的环状双链闭合DNA病毒，具有嗜上皮性和组织特异性。研究表明，HPV与宫颈病变，特别是宫颈癌密切相关，99%以上患者的宫颈癌组织中可以发现 HPV 病毒颗粒，且HPV 阳性患者宫颈癌的发生风险是阴性患者的200倍[2]。HPV按照致癌性的大小分为高危型（HR-HPV）和低危型（LR-HPV），其中HR-HPV的持续反复感染是引起子宫颈上皮内瘤样病变( cervical intraepithelial neoplasia，CIN) 和宫颈癌的主要原因。HPV感染可分为单一感染和多重感染，HR-HPV感染以单一感染为主，主要的亚型包括HPV 52，16，18，58，53等[3]~[6]。HPV多重感染率相对较低，并以二重HR-HPV感染为主[7]。流行病学研究表明，除少部分CIN可进展为宫颈癌外，大部分未经治疗的CIN可自然逆转，原因在于HPV病毒复制周期长，感染数周至数月的时间后病毒释放致病，这也是宫颈鳞状上皮基底细胞完全分化、脱屑的过程，所以大部分女性的HPV可被清除；但当病毒或宿主基因突变或宿主防御机制缺陷时，可诱导 HPV的基因片段整合到宿主宫颈上皮细胞基因组，使CIN进展为宫颈癌。近年来 CIN 的发病率呈明显上升趋势，因此对HPV进行分型检测具有十分重要的意义。目前常用的HPV的检测方法有基于病理学的传统方法和基于分子生物学的新型方法。
（一）HPV的传统检测方法
HPV的传统检测方法主要包括巴氏涂片细胞学检测、阴道镜检查、宫颈活检组织病理学检查、电镜下查找病毒颗粒、宫颈摄像检查以及宫颈荧光检查等和应用免疫组化法[2]。但这些传统方法存在较高的假阴性率和假阳性率，且不便于对患者感染的HPV 进行分型。
（二）HPV的分子生物学检测方法
目前常用的HPV-DNA 的分型检测方法包括二代杂交捕获法（hybrid capture2, HC2）、PCR 结合免疫发光法、核酸侵入反应法、荧光定量 PCR 法、芯片杂交法等[8]。
（1）HC2 技术
HC2 技术主要是利用特异性识别HPV DNA序列的RNA探针对待测样本中的HPV DNA进行捕获，然后通过标记的抗体识别 RNA/DNA 杂交链，最终采用化学发光法对杂交链进行信号放大， 通过测定光信号对13 种高危型 HPV（l6、 18、 31、33、 35、 39、 45、 5l、 52、 56、 58、 59 和 68 型） 进行半定量检测[9]。该方法操作简便，无需进行待测模板扩增，应用广泛。但其不足之处在于：首先因为没有进行核酸扩增，造成检测灵敏度较低；并且该方法是通过探针杂交来控制检测的特异性，而杂交条件如果控制不好往往会导致假阳性结果；此外，该方法只能给出是否感染上述的13种HR-HPV的结果而无法区分感染的HPV的具体亚型。
