重组APS激酶在大肠杆菌中的表达优化研究文献综述

 2022-01-02 04:01

全文总字数:3078字

文献综述

文 献 综 述1.研究背景 本课题研究的内容为重组APS激酶在大肠杆菌中的表达优化研究。

APS激酶磷酸化APS以形成 PAPS,这种酶较近才引起学者的关注,不像酵母、真菌和许多细菌,植物直接使用APS而不是PAPS进行硫还原代谢[1]。

因此,在这些生物体中,APS 激酶是硫酸盐同化的重要组成部分。

它实际上主要从同化物中吸收硫以合成 PAPS,因此是初级和次级硫代谢的分支点,其活性的强弱决定细胞内硫酸盐的不同代谢方向[2]。

而硫是生命活动的必需元素,主要以-2和 6价发挥生物学功能.硫的活化是硫同化代谢的关键反应,包括ATP硫酸化酶(ATPS)催化硫酸盐与ATP反应生成腺苷-5'-磷酰硫(APS)和焦磷酸(PPi)以及腺苷-5'-磷酰硫酸激酶(APSK)催化APS的3'羟基磷酸化生成3'-磷酸腺苷5'-磷酰硫(PAPS)两步反应.PAPS为硫酸基供体是酶法合成硫酸寡糖的重要化学物质,构建PAPS循环再生体系是重要研究课题,APS激酶是PAPS合成的一个关键酶,原核表达存在表达量低、表达产物为包涵体、表达产物没有活性等问题,因此APS激酶的原核高效表达是制备硫酸寡糖过程中非常重要的步骤。

2.研究意义天然来源的硫酸化糖类大多来自于海洋生物,如岩藻聚糖硫酸酯、卡拉胶(硫酸半乳聚糖)、海胆多糖、海藻多糖、海洋硫酸鼠李糖等,具有独特的结构和聚阴离子的性质,在抗炎、抗凝血,抗氧化、抗病毒、增强免疫,以及肿瘤辅助治疗等方面发挥巨大作用。

然来源的硫酸化糖类大多来自于海洋生物,如岩藻聚糖硫酸酯、卡拉胶(硫酸半乳聚糖)、海胆多糖、海藻多糖、海洋硫酸鼠李糖等,具有独特的结构和聚阴离子的性质,在抗炎、抗凝血,抗氧化、抗病毒、增强免疫,以及肿瘤辅助治疗等方面发挥巨大作用。

硫酸化化合物广泛存在于胞浆、细胞表面及胞外基质中,在肌体发育、分化、免疫、解读和信号传递等生命活动中起着不可替代的作用。

如可以利用PAPS合成芥子油苷[3],糖胺聚糖的合成[4],PAPS是化合物硫酸化过程中最常用的硫酸基供体,但目前合成PAPS并最终实现其工业化应用还困难重重.APS激酶是PAPS合成的一个关键酶,原核表达存在表达量低、表达产物为包涵体、表达产物没有活性等问题,因此APS激酶的原核高效表达是制备硫酸寡糖过程中非常重要的步骤。

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