补骨脂/淫羊藿制备工艺与斑马鱼评价文献综述

 2022-12-28 09:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

1.课题解决的问题

补骨脂是豆科植物补骨脂的干燥成熟果实,中医认为其具有补肾助阳,纳气平喘,暖脾止泻的作用。现代药理研究表明:补骨脂具有扩张冠状动脉,舒张支气管平滑肌,增进免疫,抗菌,增强皮肤色素等作用。补骨脂中含有多种活性成分, 目前,补骨脂中共发现了117 个化学成分,其中,香豆素类及黄酮类化合物是其主要活性成分,补骨脂酚可对肾细胞产生毒性[1,2]。本实验对水煎法与水浸法进行比较,发现水浸法在不影响主要活性成分浸出的同时,可以大幅降低补骨脂酚的浸出率。通过正交实验得出一套较为实用的补骨脂水浸工艺。

淫羊藿是小檗科多年生草本植物,为中国传统补益中药,具有坚筋骨、益精气、补腰膝、强心力等作用。现代研究表明,淫羊藿对高血压、高血脂症、不育症、神经衰弱及老年功能性疾病等有一定的疗效。淫羊藿的主要有效成分为总黄酮和多糖。近年来,淫羊藿毒性引发越来越多的关注[3]。马维坤[4]等人经实验得出淫羊藿的醇提和水提工艺,分别为醇提:40倍80%的乙醇回流提取1.5h;水提:即加60倍水、浸泡药材1.5h、煎煮2次、每次2.0h。本实验通过斑马鱼模型,对水提与醇提进行对比,优选出更为合理的减毒工艺。

斑马鱼具有体外受精、发育、胚体透明、发育快、高通量、低成本筛选等特点。基因组学研究发现其基因与人类基因87%相似,斑马鱼胚胎发育毒性模型覆盖胚胎发育的全过程,因此可在体外试验与体内试验之间建立良好的连接,是评价药物潜在发育毒性的理想模型[5-9]。本实验通过观测补骨脂和淫羊藿对斑马鱼胚胎发育的影响,进而判断出药液毒性高低,从而选出补骨脂和淫羊藿的最佳减毒工艺。

2、研究方法和技术路线

补骨脂水浸工艺的正交实验优化

设计说明:根据对影响选浸泡工艺的重要因素,选择加水量(倍)、浸泡时间(h)、浸泡次数3个因素进行考察。

因素水平设计:选择加水量、浸泡时间、浸泡次数3个因素进行L9(34) 正交设计(见表1)。并以香豆素类(补骨脂苷和异补骨脂苷)含量和为指标,优选补骨脂水提工艺条件。

实验方法:称取补骨脂50g,按正交实验条件,用热水(75℃)浸泡,滤过,滤液合并,取样(相当于10mg生药),加80%甲醇至2ml,用高效液相色谱法测定补骨脂香豆素类和补骨脂酚含量。剩余药液取样(相当于25g生药)水浴蒸干,测干浸膏得率。

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