开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 研究背景
卵巢癌是妇科恶性肿瘤中最致命的疾病，五年存活率仅为30%左右。卵巢癌的发病率低于宫颈癌和子宫内膜癌居妇科恶性肿瘤的第三位，但死亡率却超过宫颈癌及子宫内膜癌之和，高居妇科癌症首位。OCT1 是细胞多潜能性诱导因子OCT4的家族基因，作为转录因子具有相似的DNA结合序列，OCT1作为重要的细胞转录调控因子，广泛地分布于各种细胞中，转录激活多个下游基因，近期研究提示OCT1是成体干细胞和肿瘤干细胞的决定因子。本课题旨在研究过表达OCT1在卵巢癌细胞中作用，为以后的研究提供基础。
- 实验内容
1、设计OCT1基因的PCR扩增序列，选择合适酶切位点，装入载体中，克隆OCT1的单克隆质粒。 2、利用三质粒系统包装慢病毒，将OCT1的单克隆质粒包装成慢病毒。 3、将慢病毒OCT1感染卵巢癌细胞株A2780，经过药筛实验，筛选阳性率较高的过表达OCT1细胞株OCT1-A2780。 4、设计OCT1的qRT-PCR的检测引物，并提取细胞株OCT1-A2780的RNA，逆转录成cDNA后进行qRT-PCR检测，分析实验数据，验证过表达OCT1成功后，即完成稳转细胞株的构建。
- 拟解决问题：
OCT1在卵巢癌细胞中的作用初步成果及完成稳转细胞系的构建
- 实验进度安排
2016.2~2016.3 了解课题内容，查阅相关文献
2016.3~2016.4 序列比对同源模建，克隆OCT1的单克隆质粒
2016.4~2016.5三质粒包装病毒及感染药筛实验
2016.5~2016.6完成稳转细胞株的构建
2016.6 整理资料，撰写论文
- 综述
慢病毒载体发展与应用
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