以捕获B细胞为目的能够在大肠杆菌表面蛋白表达的外源基因片段的设计与检测文献综述

 2022-08-07 09:08

细菌表面展示系统的发展及应用

摘要:细菌表面展示系统是近年来发展起来的,是微生物表面展示系统的一个分支。其主要原理是指通过重组DNA技术,将外源功能蛋白表达并定位于特定细菌细胞的表面,以达到一定的研究与应用目的是一项新的蛋白质应用技术。大肠杆菌表面展示系统具有较强的可控性和较高的展示效率,可被应用于疫苗研发及单克隆抗体制备,抗原表位分析,多肽库筛选等方面。本文对细菌表面展示系统的研究现状进行了综述,并对其发展和应用前景做出了展望。

Abstract: Bacterial surface display system developed in recent years, is a branch of microbial surface display system. Its main principle is to use recombinant DNA technology to express and locate exogenous functional proteins on the surface of specific bacterial cells in order to achieve certain research and application purposes. This is a new protein application technology. Escherichia coli surface display system has strong controllability and high display efficiency, can be used in vaccine development and monoclonal antibody preparation, antigen epitope analysis, peptide library screening and so on. In this paper, the research status of bacterial surface display system is reviewed, and the prospects of its development and application are also forecasted.

关键词: 大肠杆菌; 表面展示; 外援功能蛋白;重 组DNA技术

Key words: Escherichia coli; surface display; foreign aid function protein; recombinant DNA technology

一、文献综述

大多数生物技术都是经历了噬菌体—细菌—真核(酵母菌)的三个发展应用阶段,表面展示技术也不例外。包括:1985年Smith等人创建噬菌体表面展示技术,次年,Freudl 报道细菌表面展示技术,以及近年来兴起的酵母菌表面展示技术与杆状病毒表面展示系统。近年来,多肽、蛋白质递呈技术被广泛应用于生物化学、免疫学、蛋白质工程等生命科学领域,随之出现了一系列的表面展示技术,如:噬菌体、核糖体、酵母菌、杆状病毒等多种表面展示系统。细菌展示系统,可将外源蛋白、多肽展示在细菌的表面,而广泛应用于发展疫苗、文库及其筛选、单链抗体的表达、细胞吸附和生物催化等领域[1]

  1. 细菌表面展示体系

细胞表面展示体系通常由运载蛋白、靶蛋白(又称乘客蛋白)和受体菌三者组成,其中运载蛋白与靶蛋白以融合蛋白的方式交联,根据运载蛋白与靶蛋白融合位置的不同,一般分为 N 端融合、C 端融合和三夹板式融合等3种交联方式。

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